Op jonge leeftijd toonde Ab Hofstee al zijn talent voor welsprekendheid, waardoor hij op slechts tienjarige leeftijd lid werd van de Kamper Rederijkers. Zijn bekendheid groeide dankzij zijn rol als Boer Voorthuizen in de KRO-serie Stadhuis op stelten, waarbij hij landelijke faam verwierf op televisie. Hofstee was ook te zien in verschillende andere televisieseries.

In Oebele vertolkte hij de rol van Paulus de Postbode en in Kunt u mij de weg naar Hamelen vertellen, mijnheer? speelde hij Hildebrandt Brom, stadsklepperaar en verliefd op Brechtje, de huishoudster van de burgemeester.

Daarnaast had hij rollen in de AVRO-televisieserie Hollands Glorie (1977) en de speelfilm Pinkeltje (1978). Hofstee bracht ook muziek uit onder het pseudoniem Jukebox Johnny in de vroege jaren 60.